Multiwell hüceyrə mədəniyyət plitələrində möhürləmə və çirklənmə problemləri

Çox quyu hüceyrə mədəniyyət plitələrinin yüklənməsi və işlənməsi:

Hüceyrə mədəniyyəti plitəsi də hüceyrə əməliyyatları edərkən ciddi ASEPSIS prinsipi də izləyir. Bütün əməliyyatlar standartlaşdırılmış və elmi olmalıdır və hüceyrələrin böyüməsinə əlavə təsir göstərməyəcəkdir. Ən çox görülən problem, nümunəni əlavə etdikdən sonra hüceyrələrin vahidliyini necə təmin etmək və mühitin hüceyrələrin böyümə vəziyyətinə dəyişməyin təsirini minimuma endirməkdir.

soruş:
96 və 24 quyu mədəniyyətli plitələr və ya petri yeməkləri çox boşdur, bu da havalandırma üçün əlverişlidir, lakin bakteriya, kif və digər çirkləndiricilər də içəri girəcək?

Cavab:
Qapaq çox boşdur, yarı açıq mədəniyyətə aiddir və bunun məqsədi havalandırmaqdır (əslində, mədəniyyət yeməyi mədəniyyət yeməyi ilə tam mübadiləsi və mədəniyyətin pH dəyərini qorumaqdır orta).
Hər şeyin üstünlükləri və mənfi cəhətləri var, əlbəttə ki, çirklənmə ehtimalını artırır. Bundan əlavə, bu, yeməyindəki mayenin buxarlanmasına səbəb olur, bu, dərmanların dəqiq dozası üçün nəzərəçarpacaqdır. Buna görə aşağıdakı iki tədbir lazımdır: a. İnkubatordakı hava təmiz olmalıdır (müntəzəm ultrabənövşəyi işıq, alkoqol qırıqlığı və inkubator mümkün qədər az açılmalıdır) b. İnkubatordakı rütubət həmişə 100% səviyyəsində saxlanılmalıdır (inkubatorda steril distillə edilmiş su ilə lavabo).
Petri yeməyi kimi, bu da alt-üst qapaq olan bir konteynerdir və çirklənməyəcəkdir. Əsasən, qapağın "l" kənarında yaradılan hava axınının mənfi təzyiqi olduğuna görə, tozun mikroorqanizmləri var və hava axınının apardığı toz mənfi təzyiq yaradan örtüyün kənarından keçə bilməz. Havalandırma effekti yalnız havanın yayılması ilə və hava axını yaranmayacaq, buna görə yalnız nəfəs alacaq və bakteriyalara nüfuz etməsin.

soruş:
24 quyu boşqabdan istifadə edərək, bəzi quyularda (ultra təmiz dəzgahda) əməliyyatlar var və digər quyularda mədəniyyətli hüceyrələr var. Bunun çirklənməsinə səbəb olacağından narahatam. Diqqət yetirəcəyimi bilmirəm?

Cavab:
Əməliyyat ultra təmiz skamyada standartlaşdırılıbsa, yaxşı olmalıdır. Düşünürəm ki, mədəniyyət plitəsinin örtüyünün tam istifadəsini, yalnız işlədiləcək delikləri ifşa etməyə və digər delikləri örtükləri ilə örtməyə çalışın.
İstifadə etməzdən əvvəl hərtərəfli düşünün və bütün deliklərdən tam istifadə edin; Yalnız bir neçə çuxurdan istifadə etməlisinizsə, yalnız bir tərəfdən istifadə edə bilərsiniz və qalanını örtüklə örtə bilərsiniz. Əvvəlcə sağ çuxurdan istifadə etməyə alışmışam (sağ ələ nümunələr əlavə etmək rahatdır).

İşləyərkən, lövhənin bir tərəfini qaldırmaq üçün bir neçə şüşə slayd istifadə edin, qapağı tamamilə açmayın, ümumiyyətlə heç bir problem yoxdur.
Qeyri-bərabər hüceyrə paylanması və həllər

soruş:
Hüceyrələr mədəniyyət plakasında peyvənd olunur və hüceyrələr həmişə periferik hissədə toplaşır, bununla necə davranmaq olar?

Cavab:
Hüceyrələrinizin necə qarışıq olduğunu soruşa bilərəmmi? Bu, mədəniyyət boşqabını titrəyir və ya silkələyirmi? Sonuncu, bir dairədə sarsılırsa, hüceyrələrin mərkəzdənqaçma qüvvəsi səbəbiylə periferik hissəyə atılacaq, ortada daha az hüceyrə səbəb olur. Dörd həftədən çox!
Budur, yaxşı bir yoldur: toxum boşqabını becərmədən əvvəl mədəniyyət plakasını bir neçə saat doyma üçün inkubatora qoyun və sonra çıxarın. Hüceyrələri əkərkən güc yüngül olmalıdır. Yavaş-yavaş əlavə etmək hüceyrə aspeniyasının boşqab quyuslarına axmasına imkan verir və mədəniyyətli hüceyrələr əsasən bərabər böyüyür. Heç vaxt bir sarsıntı ilə silkələməyi unutmayın və ya hüceyrələrinizin dediyi kimi bir yerə yığılacaq.
Mədəniyyət plakasının deşik diametri nə qədər kiçikdirsə, bu fenomen daha aydındır. Bu fenomen 24 və 96 nömrəli plitələr üçün qaçılmazdır, çünki maye divara yapışdırılır ki, quyuda mədəniyyətin həlli maye səviyyəsi meydana gətirməsin, ancaq konkav güzgüsü kimi, periferiya yüksəkdir. Bununla birlikdə, bu iki növ orifice plitələrdən istifadə edərkən, əlavə müdaxilə ehtiyacı səbəbindən kifayət qədər miqdarda mədəniyyət həllini əlavə etmək mümkün deyil, buna görə də hüceyrələr mədəniyyətin həlli ilə birlikdə "kənar kolleksiya" görünməsi üçün. Bu, hansı göstəricilərə müşahidə etməyinizdən asılıdır. Əgər MTT, immunohistokimya hüceyrə qatlanmasına görə nəticələrə təsir edəcəkdir.
Hüceyrələri həzm edərkən, hüceyrə yığılmalarının qarşısını almaq üçün bərabər şəkildə boru kəmərinə diqqət yetirin və quyuda mədəniyyət həlli miqdarı kifayət olmalıdır. Ümumiyyətlə, interveasiya edərkən və həllini müdaxilə əlavə edərkən həllini bir dəfə dəyişdirərkən kifayət qədər mədəniyyət həllini əlavə edin. Müdaxilə həllinə əlavə olunan mədəniyyət həllinin miqdarı, peyvənd zamanı mədəniyyət həllinin miqdarına bərabərdir, bu vəziyyətdə "Edge Set" fenomeni təkmilləşdiriləcək, buna görə də cəhd edə bilərsiniz.

soruş:
Etdiyim şey lövhə meydana gəlməsi təcrübəsi idi. Hüceyrələri vahid bir qatda yaymaq yaxşıdır. Virusun peyvənd edildiyi zaman deliklərin çoxu yaxşıdır və bəziləri vahid deyil. Hüceyrə qrupunda böyük fərqlər var. Hüceyrələr əlavə edərkən hansı metoddan istifadə etdiyinizi soruşmaq istərdim?

Cavab:
Hüceyrələri həzmdən sonra bir hüceyrə asqısına çevrilmək üçün kriketi üçün vacibdir! Hər quyuda hüceyrələrin sayının boşqab parçalanarkən ardıcıl olduğundan əmin olun!
Əlbəttə, emal amilləri də var. Quyular arasındakı paralelizm də çox vacibdir. Məsələn, dərman əlavə edərkən hər bir quyunun konsentrasiyasının ardıcıl olmasını təmin etmək üçün təmizləndikdən sonra dərmanı qarışdırın!
Bundan əlavə, hüceyrələr və dərmanlar əlavə edərkən, test qrupu və nəzarət qrupu növbə üçün nümunələr əlavə olunan hüceyrə sıxlığı və dərman konsentrasiyasındakı fərqin qarşısını almaq üçün növbə ilə əlavə olunmalıdır!

soruş:
Zərbə artıq vahiddir, ancaq planking, 6 dəlik və 24 dəlik həmişə bir qədər qeyri-bərabərdir və ortada bir az cəmləşmişdir. Üstəlik, hesablama aparılıb və bir və ya iki gündən sonra, hər bir çuxurun sıxlığı aşkarlanmasına təsir edəcəkdir. Yaxşı bir yol varmı?

Cavab:
Bir Pasteur Pipette istifadə etsəniz, hər dəfə çox əmmirsinizsə, çünki pipetdəki hüceyrələr avtomatik olaraq batacaq, tez-tez ilk bir neçə dəlikdəki hüceyrələrin sayı çox vaxt forma və maye olacaqdır S-forma marşrutunu izləyin.
Bir pipetdən istifadə etsəniz, hər zaman maye alındıqda hüceyrələrə zərər verməmək üçün göstərişlər aparılmalı və çıxarılmalıdır. İpucu ilə bir-bir deşik əlavə etmək daha doğrudur. Həm də dayandırılmanı qarışdırmaq üçün diqqət yetirin.

Paralel bir qrup qurmaq üçün n kifayət qədər böyük olmalıdır (hesablaya bilərsiniz).

Şişmindən sonra silkələməyin, çünki titrəmə hüceyrələrin mərkəzə doğru məcmuləşdirməsinə səbəb olacaqdır. Bir dəfə taxta qoymaq yaxşıdır.

Gözenli hüceyrə mədəniyyəti plakası Yongyue Tibbi hər zaman müəssisənin həyatı kimi keyfiyyət nəzarətini qiymətləndirdi və müəssisənin rəqabət qabiliyyətinin davamlı inkişafını davam etdirdi. Şirkət həmişə hüquqi və qaydalara tabe olmaq, özünütərbiyə qətlə yetirmək, özünəməxsus olmaqla sərt olmaq, əla keyfiyyət və əla xidmət göstərmək və bəyənmə standartı kimi məsuliyyət daşıyan və cəsarət almağa cəsarət etmək, müştərilərin ən böyük dərəcədə ehtiyacı. . Müştərilərlə qalibiyyət qazanmaq bizim inkişaf məqsədimizdir. Yongyue Tibbi! Etibarlı tərəfdaşınız. Daha yaxşı bir gələcək yaratmaq üçün sizinlə səmimi bir şəkildə əməkdaşlıq etməyə hazırıq.